Coronavirus y parvovirus canino

Parvovirus, estructura y ciclo infeccioso. Tema 29

Le coronavirus canin (CCoV) est généralement responsable d’infections légères et spontanément résolutives limitées au tractus entérique. Nous rapportons une épidémie de maladie mortelle chez les chiots causée par une variante pathogène du CCoV qui a été isolée d’organes présentant des lésions sévères.

Les coronavirus sont de grands virus à ARN à brin positif enveloppés (1). Trois coronavirus différents ont été identifiés chez le chien (2,3). Les coronavirus canins (CCoV) de type I et de type II sont inclus dans les coronavirus du groupe 1, et leur évolution est liée à celle des coronavirus félins (FCoV) de type I et de type II. Le FCoV type II est né d’une recombinaison hétérologue entre le CCoV type II et le FCoV type I, tandis que le CCoV type I est génétiquement plus similaire au FCoV type I qu’au CCoV type II (3). De plus, 2 biotypes FCoV dont la pathogénicité diffère ont été observés chez le chat.

L’apparition d’une maladie mortelle aiguë (péritonite infectieuse féline) est causée par des variantes pantropes (capables de se disséminer dans tout l’organisme) de FCoV entériques avec des suppressions ou des recombinaisons dans les gènes 3c et 7b à l’extrémité 3´ du génome FCoV (4). De même, les changements dans les tropismes tissulaires des coronavirus porcins et murins (5,6) et l’adaptation du coronavirus associé au syndrome respiratoire aigu sévère récemment reconnu (7) aux humains ont été liés à des mutations ou des suppressions. Un troisième coronavirus canin, CRCoV, détecté dans les voies respiratoires, a 6 copies d’ARN / μL de matrice), la rate (médiane 4,46 × 10 6 copies d’ARN / μL de matrice), le foie (médiane 9,02 × 10 4 copies d’ARN / μL de matrice), les reins (médiane 7,54 × 10 4 copies d’ARN / μL de matrice) et le cerveau (médiane 5,23 × 10 3 copies d’ARN / μL de matrice). Un effet cytopathogène induit par le virus a été observé dans les cellules A-72 et la souche CCoV type II (CB / 05) a été isolée de tous les tissus examinés, à l’exception du tissu cérébral. Une analyse immunohistochimique avec un anticorps monoclonal spécifique à CCoV a détecté un antigène CCoV dans les organes avec des lésions macroscopiques qui ont été examinées (poumons, reins, foie, rate, intestin et ganglions lymphatiques) (figure 1).

Figure 2. Arbre de voisinage de la protéine de pointe du coronavirus canin (CCoV) et du coronavirus félin (FCoV). Les souches de référence suivantes ont été utilisées pour l’analyse phylogénétique: souches CCoV type I Elmo / 02 (n ° d’accession GenBank.

La séquence de l’extrémité 3´ du génome (8,8 kb) de la souche pantropique CCoV a été déterminée par amplification RT-PCR et séquençage de fragments se chevauchant. Les protéines S, enveloppe et membrane et la nucléoprotéine ont montré un haut degré d’identité en acides aminés avec le cadre de lecture ouvert (ORF) apparenté de CCoV type II. La protéine S de la souche CB / 05 avait l’identité la plus élevée avec la souche FCoV type II 79-1683 (figure 2). La comparaison avec la souche CB / 05 n’était possible qu’avec les souches CCav de type II Insavc-1 (10) et BGF (11) et les souches CCoV type I Elmo / 02 et 23/03 (3,12) en raison d’un manque de données sur l’extrémité 3´ du génome CCoV dans les gènes codant pour les protéines non structurales (NSP) 3a, 3b, 3c, 7a et 7b. Les NSP 3a, 7a et 7b n’ont pas été modifiés. NSP 3b (22 aa) était 49 aa plus court que prévu en raison d’une délétion de 38 nucléotides et d’une mutation de changement de trame dans la séquence en aval qui a introduit un codon d’arrêt précoce. NSP 3c (244 aa) était 6 aa plus court et 79 aa plus long que les protéines apparentées de la souche entéropathogène BGF et de la souche atténuée Insavc-1a, respectivement.

Pour confirmer le potentiel pathogène de la souche CB / 05, nous avons infecté expérimentalement deux chiens de 6 mois (autorisation n ° 67/2002-C délivrée par le Ministère de la Santé d’Italie). Deux millilitres de cryolysat d’un virus de premier passage dérivé des poumons dans des cellules A-72 ont été administrés par voie intranasale aux chiens. Le cryolysat cellulaire a été testé négatif pour d’autres agents pathogènes canins courants et avait une dose infectieuse de culture tissulaire à 50% de 10 5,50 / 50 μL sur les cellules A-72 et 1,18 × 107 copies d’ARN / μL de matrice par RT-PCR en temps réel. Le virus a été isolé de nouveau des chiens infectés expérimentalement.

PARVOVIRUS Y CORONAVIRUS « Qué hacer »

Des symptômes cliniques sévères caractérisés par une pyrexie (température de 39,8 ° C à 40,1 ° C), une anorexie, une dépression, des vomissements, une diarrhée et une leucopénie ont été observés et ont persisté de 8 à 10 jours. Malgré les symptômes graves, les chiens se sont lentement remis de leur maladie.

Conclusions

Des mutations ponctuelles ou des suppressions dans la protéine S et les NSP ont été associées à des changements dans le tropisme et la virulence des coronavirus (4–7,13). La souche CB / 05 de CCoV a montré des protéines structurales et non structurales intactes, avec une protéine S étroitement liée à celle des autres CCoV de type II. Le seul changement frappant a été la forme tronquée de NSP 3b. La question de savoir si la suppression dans l’ORF de NSP 3b est impliquée dans les changements pathobiologiques doit être évaluée avec des systèmes génétiques inverses.

La présente étude décrit pour la première fois la survenue d’infections mortelles chez les chiens par des coronavirus. L’infection expérimentale de chiens par l’isolat du virus a entraîné une grave maladie systémique qui a imité les symptômes cliniques observés lors de l’éclosion. Cependant, les différents âges à l’infection (6 mois contre Lai MMC, Holmes KV. Coronaviridae: les virus et leur réplication. Dans: Knipe DM, Howley PM, éditeurs. Fields virology. 4e éd. Philadelphie: Lippincott Williams et Wilkins; 2001 p. 1163–85.